【实验目的】1.了解细胞电穿孔和电融合的基本原理2.学习电穿孔和电融合基本技术【实验原理】当细胞置于非常高的电场中，细胞膜就变得具
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一、原代细胞培养(一)原理细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长
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⑴脐带收集：用无菌止血钳夹闭脐带两端，在止血钳外侧剪断脐带，放入盛有4℃Cord Buffer的饭盒内。脐带在4℃放置不应超过2
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(一)原理细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进
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（一）动物的选择与免疫1.动物的选择 纯种BALB/C小鼠，较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均
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分为六个阶段：阶段1：反转录酶催化合成cDNA第一链阶段2：cDNA第二链的合成阶段3：cDNA的甲基化阶段4：接头或衔接子的连接
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（一）在丰富培养基中扩增质粒许多年来，一直认为在氯霉素存在下扩增质粒只对生长在基本培养基上的细菌有效，然而在带有pMBl或ColE
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1.DNA的变性解链是杂交成功的关键,Southern印迹杂交时DNA在凝胶中变性,变性方法是将凝胶浸在数倍体积的1.5mol/L
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（1）将200mg组织在冰浴条件下用消毒剪刀充分剪碎，加4ml 1×RSB缓冲液（10mmol/L Tris, pH7.4;10m
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1.取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。2.EDTA处理：先置入
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1.割(剪)尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的温水中数分钟，使尾部血管
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（一）染色法染色法是用化学药品在实验动物身体明显的部位，如被毛、四肢等处进行涂染，以染色部位、颜色不同来标记区分实验动物，是最常用
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一、拔毛法实验动物被固定后，用食指和拇指将暴露部位的毛拔去。进行采血或动、静脉穿刺时，常用此方法暴露血管穿刺的部位。拔毛不但暴露了
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制作鳞翅目幼虫干燥标本时，先将选择好的幼虫毒杀，放在吸水纸上，用镊子或钩针将幼虫肛门拉破，再用一根圆棍压住虫体，从头至尾均匀用力慢
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用具用品①解剖刀、解剖剪、镊子：用于剔除软组织。②玻璃水槽、解剖盘：用于制作过程中盛放标本。③卡片纸、大头针、胶水：用于对标本进行
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剥皮将兽体腹面朝上，并将其四肢张开，用解剖刀沿胸部至腹部的中央直线剖开皮肤。下刀时，一定不要割破腹肌，以免内脏外出沾污毛皮。腹部皮
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一、实验动物的除毛在动物实验中，被毛有时会影响实验操作与观察，因此必须除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛等。(一)剪毛法
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一、消化液的采集(一) 唾液1. 直接抽取法 在急性实验中，可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽
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当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。
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动物剥制标本的制作是指脊椎动物而言，也就是说脊椎动物的大部分种类都可以制成剥制标本，但在实际应用中，主要适用于哺乳类和鸟类，以及一
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