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RT-PCR实验方法总结大全

主题： 发布时间：2013-06-19

RT-PCR实验有三步：抽提RNA，RT，PCR。要求：1.做RT前必需测RNA浓度，逆转录体系对RNA量还是有一些要求，常用50

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质粒DNA的纯化

主题： 发布时间：2013-06-19

（一）聚乙二醇沉淀法质粒DNA这里介绍的方法（R.Tresman,个人通讯）已卓有成效地用于纯化碱裂解法制备的质粒DNA。1）将核

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簿层层析

主题： 发布时间：2013-06-19

薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法。一般将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上，形成一薄层进行层析时一即称薄层层析。其原理与

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PCR实用技巧

主题： 发布时间：2013-06-19

增加PCR的特异性：1.primersdesign这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合

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mRNA差别显示技术（DDRT-PCR）

主题： 发布时间：2013-06-19

随着PCR技术的发展，人们在此基础上建立起了一系列基于基因分离的新技术新方法。如mRNA差别显示技术（DDRT-PCR）、以及进一

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基因定位的方法

主题： 发布时间：2013-06-19

1.体细胞杂交法 体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。将从身体分离的体细胞做组织培养进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学（som

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基因芯片的制备

主题： 发布时间：2013-06-19

1 原位光刻合成寡聚核苷酸原位光刻合成技术是由Affymetrix公司开发的，采用的技术原理是在合成碱基单体的5'羟基末端连上一个

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siRNA实验成功要点

主题： 发布时间：2013-06-19

1. 对每个基因设计并检测两到四个siRNA序列为了找到潜在靶位点，扫描靶基因中的AA序列。记录每个AA 3’端19个核苷酸作为潜

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DNA酶切

主题： 发布时间：2013-06-19

一、DNA酶切反应1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限

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细胞培养的微生物污染排除

主题： 发布时间：2013-06-19

一、抗生素除菌法：用BM-1（截耳素衍生物）和BM-2（四环素衍生物）抑制支原体1.抗生素制备：均可用PBS配成250×浓缩液-2

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免疫荧光实验

主题： 发布时间：2013-06-19

一、直接法1.标本经固定后，PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体，湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.

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双向电泳

主题： 发布时间：2013-06-19

蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.co

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siRNA的转染

主题： 发布时间：2013-06-19

将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种：1.磷酸钙共沉淀将氯化钙，RNA(或DNA

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定点突变技术--从单点突变到多点突变

主题： 发布时间：2013-06-19

体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能

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基因突变检测技术

主题： 发布时间：2013-06-19

对未知突变进行分析的方法1.RNA酶A切割(RnaseAcleavage)在一定条件下,异源双链核酸分子RNA：RNA或RNA：D

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生物反应过程培养液成分在线检测技术

主题： 发布时间：2013-06-19

蹇华丽 吴振强 梁世中(华南理工大学食品与生物工程学院 广州 510640)摘要本文讨论目前常用的几种生物反应过程培养液成分在线检

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性别鉴定的方法

主题： 发布时间：2013-06-19

生殖细胞的性别鉴定，可以藉由精子与着床前的胚来着手。精子的性别鉴定，可利用精子分离仪来筛选带有Y或X染色体的精子。其原理是带有X染

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常用饲料添加剂的快速鉴别

主题： 发布时间：2013-06-19

1、维生素A肉眼看为淡褐色或灰黄色颗粒。取样为0.1克，用无水乙醇湿润研磨使其溶解，加氯仿10毫升，再加三氯化锑的氯仿溶液0.5毫

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免疫组织化学技术

主题： 发布时间：2013-06-19

免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、

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免疫荧光细胞化学染色方法

主题： 发布时间：2013-06-19

一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。二、荧光抗体染色方法（一）直接法1.

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